La ADN polimerasa Pfu es una proteína termoestable aislada y purificada a partir de cepas recombinantes de E.coli que contienen el gen de la ADN polimerasa de Pyrococcus furiosus, con un peso molecular de aproximadamente 90 KD. Con actividad polimerasa 5'→3' y actividad exonucleasa 3'→5', puede eliminar las bases no coincidentes insertadas durante la extensión.